《合唱吧！300》每期将由两组不同类型、代际的歌手作为合唱发起人，各携300名歌迷以创意合唱形式进行PK对决，以脑洞大开的限定舞台表演竞争本季最强互动演唱。值得一提的是，在正式登台前，合唱发起人与由歌迷将不会同台彩排，登台即正式演出，共同呈现燃点泪点齐飞，集体为爱发光的创意合唱秀。在《合唱吧！300》的舞台上，歌手不再是唯一的表达者，歌迷也将成为舞台的主角之一。这不仅是一次前所未有的星素合作，更是歌手与歌迷之间情感的互通与释放，有网友评价这将是“300人超级大团的限时出道”。在前5期1对1对抗战中，每期PK胜负结果将由现场各方合唱团的实际到场人数、4名VIP观众的点赞分数及场外观众限时48小时的点赞率决定，每期综合得分较高者将有资格进入第七期的终极合唱夜。而在第6期的特别节目中，将呈现由10组艺人献给歌迷的特别回馈舞台，对歌迷一直以来的支持和喜爱表达感谢。